QQ授权登录 会员注册 会员登陆

医用臭氧的细菌培养实验

2018-03-09 15:11 作者:admin 栏目: 医疗应用 标签:  医用臭氧  

臭氧具有强氧化性,在体外有强大的杀菌作用,其杀菌作用建立在一定浓度和一定作用时间的基础之上。由于医用臭氧发生器的组件并不能确保其##无菌,那么,医用臭氧中是否含有细菌,医


 
  臭氧具有强氧化性,在体外有强大的杀菌作用,其杀菌作用建立在一定浓度和一定作用时间的基础之上。由于医用臭氧发生器的组件并不能确保其##无菌,那么,医用臭氧中是否含有细菌,医用臭氧在注射进机体和体内抗氧化系统作用后后是否仍保持其强大的杀菌能力?本研究就以上问题进行初步的探索。
 
  材料和方法
 
  1. 材料 E80型医用臭氧发生器(OZONLINE,意大利),可调节臭氧浓度范围为1~80μmol/ml,孔径为0.22μm的一次性滤过针头(以上均由南方医院介入##科提供);wistar大鼠16只(南方医科大学实验动物中心提供,体重180~220g,雌雄不限);一次性血琼脂培养皿32个(郑州安图绿科生物工程有限公司生产);CO2培养箱(Queue,美国)、超净工作台(南方医院创伤骨科实验室)。
 
  2. 方法
 
  (1) 医用臭氧关节腔注射后取关节液进行培养
 
  不同浓度医用臭氧的获取:
 
  用橡胶管将瓶装医用纯氧与臭氧发生器的氧气入口相连;接通电源,打开开关,调校好氧气输出量及臭氧浓度,以获取所需臭氧浓度。用注射器按压臭氧发生器取气口即可获得臭氧,在取气时须利用气体压力将注射器活塞向上推以获取臭氧,不可主动抽取,以免混入空气。
 
  动物分组:
 
  16只wistar大鼠随机分为4组(n=4),分别在大鼠的双膝关节腔注射浓度为10μg/ml、30μg/ml、50μg/ml、80μg/ml的医用臭氧0.5ml,其中右膝关节作为实验侧(分别以臭氧10R、臭氧30R、臭氧50R、臭氧80R组表示),在采集医用臭氧时不使用一次性针头滤器;左膝关节对照侧(以臭氧10L、臭氧30L、臭氧50L、臭氧80L组表示),在采集时使用一次性针头滤器。
 
  给药:
 
  腹腔注射3%戊巴比妥钠溶液30mg/kg 将大鼠麻醉,仰卧位固定,双侧膝关节及周围皮肤备皮,碘酒、酒精消毒皮肤。将大鼠膝关节屈曲约80~90°,在膝关节内外侧各可见到一处皮肤略凹陷,此处即为膝关节内外侧间隙的体表投影区。以1ml无菌注射器采集医用臭氧0.5ml,在膝关节外侧间隙处进针,进针时可有明显的落空感,回抽注射器无血液,明确注射器针头不在血管中,遂将医用臭氧注射进大鼠膝关节腔中。不同医用臭氧浓度组大鼠均按同样方法处理。注射过程中可见到膝关节内外侧间隙凹陷处向外膨出,大腿、小腿未见肿胀,则明确臭氧注射进关节腔,而非误注到关节外。为避免医用臭氧的性状发生改变,医用臭氧开始采集到注射进机体的整个过程,争取在15s内完成。
 
  关节灌洗液收集:
 
  在进行医用臭氧注射后24小时,同样方法将大鼠麻醉,仰卧位固定,碘酒、酒精消毒皮肤。将大鼠膝关节屈曲约80~90°,以1ml无菌注射器将0.5ml的灭菌PBS溶液注射进关节腔,行关节腔灌注,使用1.5ml的无菌EP管收集该灌注液。
 
  接种培养:
 
  在超净工作台中,将各灌注液分别接种于血琼脂培养皿上,并将血琼脂培养皿置于CO2培养箱中(培养条件为36.5℃、CO2浓度0.50%)培养,培养后48小时观察各个培养皿菌落情况。
 
  (2) 医用臭氧在超净工作台中直接培养:
 
  对照组:臭氧采集口处加用一次性针头滤器
 
  以无菌软管的一端连接医用臭氧发生器,并在连接处加一次性针头滤器,软管的另外一端开口于超净工作台中,在该开口下方放置两个血琼脂培养皿,开口处距离培养皿20cm,打开医用臭氧发生器5min,并将浓度稳定于10μg/ml,此时揭开血琼脂培养皿的盖子,使培养皿暴露于医用臭氧中,20min后盖上盖子,并将血琼脂培养皿置于CO2培养箱中(培养条件为36.5℃、CO2浓度0.50%)培养,同样方法分别处理浓度为30μg/ml、50μg/ml、80μg/ml的医用臭氧。
 
  实验组:
 
  臭氧采集口处不使用一次性针头滤器 以无菌软管的一端连接医用臭氧发生器,医用臭氧发生器气体采集口连接处不使用一次性针头滤器,软管的另外一端开口于超净工作台中,在该开口下方放置两个血琼脂培养皿,开口处距离培养皿20cm,打开医用臭氧发生器5min,并将浓度稳定于10μg/ml,此时揭开血琼脂培养皿的盖子,使培养皿暴露于医用臭氧中,20min后盖上盖子,并送CO2培养箱(培养条件为36.5℃、CO2浓度0.50%)培养,同样方法分别处理浓度为30μg/ml、50μg/ml、80μg/ml的医用臭氧。
 
  (3) 统计学分析:
 
  实验数据结果使用SPSS13.0软件以配对资料的 检验进行分析,检验水准 =0.05。P≤0.05表示差异有统计学意义或有显著性差异。
 
  结果
 
  1、关节腔灌洗液培养情况
 
  关节腔灌洗液培养,对照组及臭氧80R组均无菌落出现,臭氧10R、臭氧30R及臭氧50R组中各有一个血琼脂培养皿出现菌落,菌落的数量分别为13个、8个和2个。 具体菌落生长情况如下表(表1、2)。共有3个培养皿有细菌生长,均出现在实验组中,其中臭氧10R、臭氧30R、臭氧50R每组中各有1个培养皿有细菌生长,菌落数分别为13个、8个和2个。由于实验数据无法行配对资料的 检验,故仅对结果仅行描述。从结果中可以看到,对照组无细菌生长,实验组中有3/16的培养皿有细菌生长,两组之间有差异。实验组中个亚组菌落数量随着臭氧浓度的##而明显减少。
 
  表1.两组关节灌洗液菌培养情况*
 
  对照组
 
  实验组+-Total
 
  +033
 
  -01313
 
  Total01616
 
  *“+”表示有细菌生长;“-”表示无细菌生长。
 
  由于实验结果中对照组无细菌生长,使用前述方法处理时数据中有一半的数值为0,无法进行配对计数资料的 检验分析;而改用其它方法分析,检验效能较低,可信度不高。故不对结果进行统计学分析。
 
  实验组##~4亚组菌落数量分别为13、8、2、0个(表2)。
 
  2、超净工作台中医用臭氧气体直接培养情况
 
  所有医用臭氧气体直接培养的血琼脂培养皿中,均无菌落出现。实验组和对照组间无明显差异。
 
  表2.实验组各亚组菌落数量情况
 
  组别 菌落数目
 
  臭氧10R13
 
  臭氧30R8
 
  臭氧50R2
 
  臭氧80R0
上一篇:没有了
下一篇:臭氧##医学历史与现状
臭氧技术问答更多>>
汽车臭氧消毒机的主要功能和操作方法
汽车开了一会儿后,车内多少有些异味。 而且客舱是密闭的环境,空气...
移动式臭氧发生器用在哪些地方
移动式臭氧发生器 其实一点也不隐蔽。平时我们好像很难发现移动式臭...
臭氧杀菌没有污染
臭氧杀菌无污染...
臭氧发生器工作原理
我们现在通常使用的臭氧发生器是利用高压放电产生的:氧气发生器一...
手提式臭氧发生器的安装使用方法
1.应将设备安装在干燥通风的室内;设备可壁挂可立式也可移动便携使用...
http://www.cnfoodnet.com/zt/xjsh/xjsh.png|#|夏季晒黑怎么办?看过来美白防晒的小秘方!
http://www.cnfoodnet.com/zt/jcxc/jcxc.png|#|京城小吃大搜罗
http://www.cnfoodnet.com/zt/szzw/szzw.png|#|这十种植物养在家里 夏天蚊虫不见了

沪ICP备17021875号-1 邮箱:nclep@163.com 联系电话:13356725825

Copyright © 2019 臭氧发生器网 版权所有 地址:上海金山工业区夏宁路666弄30幢 网址:www.chinachouyang.com

联系我们